目的：探究铜绿假单胞菌对氟喹诺酮类药物的主要分子耐药机制，同时探究时间和浓度对耐药基因突变的影响。
材料和方法：收集临床上对环丙沙星和左氧氟沙星敏感的铜绿假单胞菌。这些菌株用不同浓度的环丙沙星或左氧氟沙星诱导 5 天，并测定诱导前和诱导之后所有菌株对环丙沙星，左氧氟沙星和氧氟沙星的 MIC。MIC 的测定采用琼脂倍比稀释法。用 PCR 扩增 gyrA ，gyrB ，parC ，parE  基因的耐药决定区，并用 Snapgene 软件对扩增的四个基因进行序列分析以探索突变情况。用实时荧光定量 PCR 测定两个外排泵基因（mexA  和 mexE ）的相对表达水平。
结果：总共从山西医科大学第二医院收集了 11 株菌。在耐药突变株中，主要检测到 gyrA  和 gyrB  的突变，且具有 gyrB  突变的菌株的百分比明显比具有 gyrA  突变的菌株的百分比高（P <0.0001）。同时具有 gyrA  和 gyrB  突变的菌株的 MIC 并不明显高于仅有 gyrB  突变的菌株的 MIC（P >0.05）。没有检测到 parC  或 parE  基因的突变。在 gyrA  或 gyrB  突变的菌株中，氨基酸突变的数目随诱导时间和诱导浓度的增加而增加。
结论：在体外诱导实验中，环丙沙星比左氧氟沙星更容易使铜绿假单胞菌耐药。gyrB  突变在铜绿假单胞菌对氟喹诺酮类药物的耐药性中发挥重要作用。
关键词：铜绿假单胞菌，氟喹诺酮类药物，分子耐药机制，体外