目的：构建并验证针对下咽鳞癌 Fadu 细胞系的 EGFR-CAR T 细胞，为 CART 细胞技术在下咽鳞癌中的应用提供临床前依据。
方法：通过慢病毒转染构建 EGFR-CAR T 细胞和 CART 对照细胞，并对其表型进行验证。检测 EGFR 抗体在 EGFR-CAR T 细胞中的表达，验证 EGFR 在 Fadu 细胞和 HCT-116 细胞中的表达。最后，通过杀伤试验检测 EGFR-CART 细胞和 CART 对照细胞与靶细胞和非靶细胞共培养时细胞因子的释放和肿瘤杀伤作用。
结果：成功构建了 EGFR-CAR T 细胞及 CART 对照细胞，感染率在 67% 左右，细胞亚群的分布无明显差异。选择 HCT-116 作为 EGFR-CAR T 的非靶细胞，Fadu 作为靶细胞。EGFR-CAR T 细胞与靶细胞共同孵育后，细胞因子分泌明显增加，与 CART 对照组相比，EGFR-CAR T 对靶细胞具有一定的细胞毒性，靶细胞裂解率为 52.66%。
结论：本研究成功制备并验证了靶向下咽鳞癌 Fadu 细胞系的 EGFR-CAR T 细胞，为 CART 技术在下咽癌治疗中的应用奠定了基础。
Keywords: chimeric antigen receptor T-cells, epidermal growth factor receptor, hypopharyngeal neoplasm