研究背景：结直肠癌 (Colorectal caner，CRC) 是全世界范围内最普遍且死亡率较高的肿瘤之一，其发病机制复杂，涉及大量基因表达、功能及多种信号传导通路的改变。越来越多的研究证实微小 RNA (microRNAs，miRNAs) 的表达紊乱与肿瘤的发生发展密切相关，但是 miRNA 在 CRC 转移中所起的作用并不是很明确。
研究方法：运用 TaqMan Real-time PCR 技术检测临床 CRC 标本 miR-106b-5p 的表达，分析其与肿瘤临床病理表型的关系。利用慢病毒载体构建了 miR-106b-5p 的稳定细胞株，运用细胞培养、生长曲线分析、侵袭转移实验等技术分析 miR-106b-5p 对 CRC 增殖、迁移和侵袭的影响。另外运用在线 miRNA 靶基因预测软件预测 miR-106b-5p 的潜在靶基因，通过双荧光素酶、Western blot、免疫组织化学等方法进一步鉴定其靶基因。
研究结果：与癌旁正常组织相比较，miR-106b-5p 的表达水平在 CRC 组织中显著下调 (P =0.009)，且与 CRC 的淋巴结转移显著负相关 (P =0.0057)。过表达 miR-106b-5p 能够抑制 CRC 细胞的体外迁移、侵袭能力和抑制小鼠肿瘤肺转移能力。我们进一步鉴定出 CTSA 是 miR-106b-5p 的功能靶基因。miR-106b-5p 的过表达会下调 CRC 细胞中 CTSA 的 mRNA 和蛋白水平，而抑制 miR-106b-5p 表达则能提高 CTSA 表达水平。荧光素酶实验也证实 miR-106b-5p 能直接和 CTSA 3′ 端非编码区  (3′ Untranslated region，3′UTR) 上的特定位点结合。此外，在 CRC 组织中我们还发现 miR-106b-5p 表达与 CTSA 蛋白水平成负相关，CTSA 在 CRC 肝脏转移灶的表达水平高于原发灶。干扰 CTSA 表达能抑制 CRC 细胞的迁移和侵袭能力，进一步证实 miR-106b-5p 通过靶向 CTSA 从而抑制 CRC 细胞的迁移和侵袭。
研究结论：通过对 miR-106b-5p 在 CRC 中功能与分子机制的研究，我们发现 miR-106b-5p 通过作用于 CTSA 发挥抑制 CRC 细胞迁移和侵袭的能力。miR-106b-5p 表达低的患者更容易发生淋巴结转移及肿瘤的进展，miR-106b-5p 可能是 CRC 抗转移治疗的新的候选靶点。
Keywords: colorectal cancer, metastasis, miR-106b-5p, cathepsin A