研究背景：藤黄酸（gamboges acid， GA）是树脂藤黄的主要活性成分，具有高效的抗肿瘤活性。但由于藤黄酸的水溶性差及剂量限制性毒性，其临床应用受到一定的限制。细胞穿膜肽（Cell-penetrating peptides ，CPPs）可携带抗肿瘤药物进入肿瘤细胞，能够增强药物的水溶性和穿透细胞膜的能力。
目的：合成藤黄酸-穿膜肽 TAT（trans-activator of transcription, TAT）共轭物，并评估 GA-TAT 对膀胱癌 EJ 细胞生长活性的影响及探讨其作用机制。
方法：合成 GA-TAT 共轭物并通过高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）纯化和质谱法（Mass Spectrometry, MS）鉴定。通过摇瓶法测定 GA-TAT 的平衡溶解度；通过 MTT，Edu 和克隆形成实验检测 GA-TAT 对人膀胱癌 EJ 细胞生长活性的影响。将浓度为 1.0 μM 的 GA-TAT 作用于 EJ 细胞 24 小时后，通过吖啶橙/溴乙锭（AO/EB）实验和流式细胞术检测细胞的凋亡；Western 印迹法检测 cleaved caspase-3, procaspase-3,  cleaved caspase-9, procaspase-9 ,Bcl-2 和 Bax 的蛋白表达; 通过活性氧（reactive oxygen species , ROS）测定实验检测细胞内活性氧的产生。
结果：与 GA 比较，GA-TAT 的水溶性显著提高。同时 GA-TAT 增加 EJ 细胞对 GA 的摄取，并促进 EJ 细胞的凋亡。实验结果显示，GA-TAT 通过 ROS 信号通路促进 EJ 细胞的凋亡。GA-TAT 作用后的 EJ 细胞中的 ROS 水平显著增加，但 ROS 清除剂 N -乙酰基-L-半胱氨酸（N-acetyl-L-cysteine, NAC）可抑制 GA-TAT 诱导的 ROS 产生和细胞凋亡。而且，GA-TAT 能够活化 caspase-3，-9，并下调 Bcl-2/Bax 的比率，但此效应被 NAC 显著拮抗。
结论：GA-TAT 具有的促肿瘤细胞凋亡的特性，使其有望用于膀胱癌的临床治疗。
关键词：藤黄酸; 细胞穿膜肽; 凋亡; 膀胱癌