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LincRNA-ROR 通过调控 miR-145/FSCN1 增强食管鳞状细胞癌的转移和侵袭能力

 

Authors Shang M, Wang X, Zhang Y, Gao Z, Wang T, Liu R

Received 21 November 2017

Accepted for publication 23 December 2017

Published 31 January 2018 Volume 2018:11 Pages 639—649

DOI https://doi.org/10.2147/OTT.S157638

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Editor who approved publication: Dr XuYu Yang

背景和目的:为了找寻人类食管鳞状细胞癌(ESCC)早期诊断和预后的新的生物标志,研究了 linc-RORROR)作为 microRNAmiRNA)海绵在 ESCC 中的调控机制。
病人和方法:采用实时荧光定量 PCRqRT-PCR)的方法检测了 ROR 在 91 对 ESCC 癌组织及配对癌旁组织中的表达水平。利用 TCGA 数据库中 161 例食管癌(EC)组织及 11 例癌旁组织的芯片数据构建了 ROR-miRNA-mRNA 的调控网络。利用 TCGA 数据库中 96 例 ESCC 患者的数据进行了生存分析。利用 qRT-PCR,双荧光素酶报告基因试验(DLR),RNA 结合蛋白免疫沉淀试验(RIP)和蛋白质免疫印迹试验在 ESCC 细胞中验证了 RORmiR-145 和 FSCN1 之间的调控关系。利用 Transwell 细胞迁移和侵袭试验检测细胞的迁移和侵袭能力。
结果:ESCC 癌组织中 ROR 的表达显著高于癌旁组织(<0.001)。ROR 表达水平高的 ESCC 患者的生存率显著低于 ROR 表达水平低的患者(<0.001)。通过 RIPDLR 和 qRT-PCR 证实了过表达 ROR 可以下调 miR-145 至 50% 的水平。通过 DLR 鉴定了 ROR 和 miR-145 的两个有效结合位点,其中一个结合位点未被文献报道。蛋白质免疫印迹试验证明了 FSCN1 是 ROR/miR-145 的下游靶点(<0.05)。Transwell 试验的结果证实了过表达 ROR 可增强 ESCC 细胞的迁移和侵袭,且 miR-145 有缓解这些效果的能力。
结论:ROR 在 ESCC 中可作为 miR-145 的竞争性内源 RNAceRNA),并且有一个新的有效的 ROR 和 miR-145 的结合位点被发现。ROR/miR-145/FSCN1 通路被证实在 ESCC 的转移中发挥作用。ROR 可能是 ESCC 早期诊断和预后的一个癌基因样生物标志。
Keywords: ESCC, lncRNA, ceRNA, ROR, miR-145, FSCN1