背景：苦蛇酊（KSD）是北京中医药大学东直门医院优化的院内制剂，在临床上作为外用抗炎止痒药物用于治疗湿疹、特应性皮炎（AD）等疾病已有数十年。然而，其潜在的治疗机制尚未明确。

目的：本研究旨在通过结合单细胞RNA测序（scRNA-seq）、空间转录组学（ST）和动物实验，探索苦蛇酊对DNCB诱导的特应性皮炎的治疗机制。

方法：首先，我们从中医药系统药理学数据库（TCMSP）中获取苦蛇酊的活性成分及靶点，并从基因表达综合数据库（GEO）中获取特应性皮炎相关靶点，使用Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络并进行京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析。其次，通过scRNA-seq和ST技术筛选并可视化核心靶点。最后，采用DNCB诱导的特应性皮炎样小鼠模型，通过皮损评分、形态学染色、血清学检测、皮肤屏障功能测定、流式细胞术和Western blotting观察苦蛇酊的治疗效果。

结果：共获得46个药物-疾病共同靶点，其中排名前2位的靶点为NF-κB1和STAT3。scRNA-seq与ST联合分析表明，NF-κB和STAT3在大多数亚群中表达更高且更广泛，尤其是在单核细胞和CD4+ T细胞中。动物实验显示，苦蛇酊治疗改善了可见症状和皮肤屏障功能，减少了肥大细胞浸润、IgE水平、Th17细胞以及NF-κB、JAK2和STAT3的表达。