目的：采用直接连续抽样法确定健康成年人同型半胱氨酸（Hcy）代谢通路关键指标（Hcy、半胱氨酸 Cys、蛋氨酸 Met）的参考区间，并探讨其与冠状动脉粥样硬化（CA）的关联，以提升 CA 风险评估及诊断准确性。

方法：通过两中心直接连续抽样，结合问卷与实验室指标筛选 426 名健康成年人作为参考人群；另纳入 75 例经心内科医师确诊的 CA 患者（冠状动脉造影显示至少 1 支主要冠脉狭窄≥50%）。采用适配液相色谱 - 串联质谱（LC-MS/MS）的商品化检测试剂盒，对血清 Hcy、Cys、Met 水平进行标准化分析，并依据 CLSI EP28-A3c 指南，经异常值剔除与正态性转换（Box-Cox 法）后建立 95% 参考区间；通过相关性分析、多因素 logistic 回归及受试者工作特征（ROC）曲线评估指标与 CA 的关联及诊断价值。

结果：虽 Hcy、Met 在不同性别间存在显著差异，但未达到分性别建立参考区间的标准。经处理后，Hcy、Cys、Met 的 95% 参考区间分别为 7~25 μmol/L、227~410 μmol/L、21~39 μmol/L。CA 患者与健康人群相比，Hcy 水平显著升高（12.48 [9.86, 16.00] μmol/L vs 11.18 [9.21, 13.10] μmol/L，P=0.0012），Cys、Met 水平显著降低（Cys：262.40±49.08 μmol/L vs 284.00±33.95 μmol/L，P<0.0001；Met：24.49 [21.48, 26.94] μmol/L vs 29.14 [26.27, 32.40] μmol/L，P<0.0001），且 CA 破坏了三者间的相关性。多因素分析显示，Hcy、Cys、Met 均为 CA 的独立危险因素；三者联合检测的 ROC 曲线下面积（AUC）达 0.86（95% CI：0.81~0.91），特异性为 83%，敏感性为 78%，显著优于单一指标。