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多重逆转录-环介导等温扩增结合核酸级联侵入反应及纳米粒子传感器检测流感病毒

 

Authors Ge Y, Zhou Q, Zhao K, Chi Y, Liu B, Min X, Shi Z, Zou B, Cui L

Received 18 January 2017

Accepted for publication 20 March 2017

Published 3 April 2017 Volume 2017:12 Pages 2645—2656

DOI https://doi.org/10.2147/IJN.S132670

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Editor who approved publication: Dr Lei Yang

摘要:由于季节性流行和大流行,流感的发病率和死亡率都很高,因此流感病毒感染是一个全球性的公共卫生问题和经济问题。建立敏感且方便的流感病毒检测方法对于进一步的疾病控制尤为重要。环介导等温扩增(LAMP)是最为常用的核酸等温扩增技术。然而对于多重 LAMP,如何区分来自不同靶标的梯形扩增产物仍具有挑战性。对专用仪器设备的依赖限制了多重 LAMP 的现场应用。本研究通过偶联多重逆转录-环介导等温扩技术、核酸级联侵入反应技术及纳米粒子传感器建立了一种可同时检测三种亚型流感病毒(甲型 H1N1pdm09,甲型 H3 和乙型流感病毒)的检测方法(mRT-LAMP-CIRN)。敏感性试验结果表明,该方法对甲型 H1N1pdm09 和 H3 的检测敏感性为 10 拷贝 RNA 分子/反应,对流感 的的检测敏感性为 100 拷贝 RNA 分子/反应。mRT-LAMP-CIRN 具有较高的检测特异性,可成功地区分靶病毒和其它遗传及临床上的相关病毒。临床样本检测结果表明,该方法总的检测敏感性和特异性分别为 98.3% 和 100%。本研究建立的 mRT-LAMP-CIRN 具有较高的检测敏感性和特异性,成本低,而且无需特殊仪器,适合流感病毒的现场检测。
Keywords: multiplex, LAMP, gold nanoparticles, on-site detection, influenza virus