摘要：

目的：本研究旨在探讨地黄梓醇（CAT）对体外培养的人牙周膜干细胞（hPDLSCs）增殖及成骨分化的影响及其机制，并在大鼠正畸牙移动（OTM）模型中评估CAT对体内牙周组织重塑的作用。

方法：体外培养hPDLSCs，通过细胞计数试剂盒-8（CCK-8）、茜素红（ARS）染色及钙定量分析、碱性磷酸酶（ALP）染色和活性测定、免疫荧光测定等方法，检测hPDLSCs的增殖和成骨分化。此外，通过qRT-PCR和Western blot检测编码1型胶原（collagen type 1， COL-1）、ALP、RUNX家族转录因子2（RUNX-2）的表达。为验证雌激素受体-α（ER-α）介导的磷酸肌醇-3-激酶-蛋白激酶 B（PI3K/AKT）通路在这一过程中的作用,采用PI3K抑制剂LY294002和ER-α特异性抑制剂甲基哌啶吡唑(Methyl-Piperidino-Pyrazole, MPP)，通过Western blot分析成骨标志物、ER-α、AKT和p-AKT（磷酸蛋白激酶 B）的表达。将18只雄性SD大鼠随机分为对照组（等量生理盐水）和CAT组（给予CAT）。利用显微计算机断层扫描（micro-CT）分析牙齿移动和牙槽骨变化；苏木精-伊红染色（HE）及抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色用于观察牙根间牙周组织形态变化；免疫组织化学染色（IHC）用于检测COL-1、RUNX-2、核因子-κB（NF-κB）配体（RANKL）的表达，以评估牙周组织重塑。使用GraphPad Prism 8软件进行数据分析，两组以上差异采用单因素或双因素方差分析（ANOVA），然后进行Tukey检验。p < 0.05被认为具有统计学显著性。

结果：体外实验显示，10 μM CAT显著促进hPDLSCs的增殖、ALP活性及钙结节的沉积，并显著上调COL-1、ALP、RUNX-2、ER-α和p-AKT的表达。通过LY294002抑制了PI3K/AKT通路，并通过MPP验证了该效应由ER-α介导。体内实验证明，CAT促进大鼠牙根张力侧COL-1、RUNX-2的表达，减少压力侧破骨细胞数量并下调RANKL的表达，抑制了OTM。

结论：CAT可通过ER-α/PI3K/AKT通路促进hPDLSCs体外增殖和成骨分化，并可通过OTM模型促进体内牙周组织重塑。这些结果表明，地黄梓醇在预防OTM后复发方面具有潜在的临床应用潜力。

关键词：地黄梓醇、牙科、正畸牙移动、复发、人牙周膜干细胞、成骨分化、ER-α/PI3K/AKT通路