摘要：非病毒基因载体完成有效的基因传递需要克服许多生物屏障，包括与细胞膜的结合，细胞膜的转运和摆脱溶酶体的降解，与载体的充分解离等等。本研究的目的是比较一种阳离子聚合物和 MMP-9siRNA 组合的复合物 (β-CD-PAMAM/ MMP-9siRNA 复合物, 简称 “阳离子复合物” ) 与商业化的脂质体/ MMP-9siRNA 复合物 (Lipofectamine^® 2000/MMP-9siRNA 复合物, 简称 “脂质体复合物” ) 在细胞转运机制中的差异。我们通过荧光显微镜、流式细胞术和 RT-PCR 等研究方法观察不同的内吞途径化学抑制剂对阳离子复合物和脂质体复合物的细胞吸收和转染效率的抑制情况；两种复合物与内吞标记物的细胞内共区域现象及复合物在细胞内的转运过程我们采用的是激光共聚焦进行观察。同时我们利用内涵体酸化抑制剂探讨两种复合物的内涵体逃逸机制。结果显示：阳离子复合物主要通过非网格蛋白-非小凹蛋白依赖的内吞作用吸收入 HaCat 细胞，并能逃避溶酶体降解作用从而获得成功转染；而脂质体复合物主要通过网格蛋白依赖内吞途径（CDE）、小凹蛋白依赖的内吞途径（Cav-ME）和大胞饮作用吸收入 HaCat 细胞，但仅有通过 CDE 吸收的那部分脂质体复合物可以获得成功转染。两种复合物均通过质子泵作用逃逸出内涵体/溶酶体，但相对而言，脂质体复合物的逃逸速度更快，酸性细胞器对脂质体复合物的降解作用更微弱，这可能是导致 β-CD-PAMAM/ MMP-9siRNA 复合物转染效率较脂质体复合物低的主要原因。这些研究结果有助于为合理设计具有高转染效率、低毒性的新型基因运载载体提供依据。
Keywords: β-CD-(D3)7, liposome, endocytosis, endolysosomal escape, intracellular trafficking