引言：恶性肿瘤的基因治疗既需要有效的抑癌基因，又需要高效表达目的基因的安全载体。生长抑制因子 4（ING4）通过多种途径抑制肿瘤细胞生长，白介素-24（IL-24）也对多种恶性肿瘤有抑制作用。腺病毒（Ad）作为基因载体的感染效率高，但高剂量腺病毒的潜在毒性限制了其临床应用。柞蚕丝素蛋白（ASF）是一种细胞相容性良好并可被生物降解的天然高聚物，富含的 Arg-Gly-Asp（RGD）序列能选择性地与整合素受体 α_vβ₃ 和 α_vβ₅ 结合，而这些受体在肿瘤血管和肿瘤细胞中是高表达的。
方法：本研究将双基因共表达转移质粒与经 RGD 修饰的 pAdEasy-1 腺病毒骨架质粒进行同源重组，构建 ING4 和 IL-24 双基因共表达腺病毒载体。用低分子量 PEI 对 ASF 进行改性制备阳离子化 ASF（CASF）。使表面带负电荷的 Ad 载体结合带正电荷的 CASF 后，得到 CASF/Ad 复合物。
结果：CASF/Ad 复合物分别感染人肝癌细胞 SMMC-7721 和正常肝细胞 L-02 时，感染效率明显高于裸 Ad。CASF/Ad 复合物能有效地介导目的基因 ING4 和 IL-24 在 SMMC-7721 细胞中的表达，从而诱导肝癌细胞 SMMC-7721 凋亡。进一步检测感染 CASF/Ad 复合物后 SMMC-7721 和 L-02 细胞的存活率，发现 SMMC-7721 细胞的生长受到显著抑制，而 L-02 细胞的生长和增殖未受影响。
结论：本研究构建的 CASF/Ad 复合物对人肝癌细胞 SMMC-7721 的感染效率提高，抑制生长作用增强，可以在降低腺病毒使用剂量的情况下仍达到较高的感染效率和有效的抑癌作用。
关键词：丝素蛋白，腺病毒，阳离子化改性，肝肿瘤