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Authors Wang FY, Liang ZY, Yang YQ, Zhou LQ, Guan LL, Wu WL, Jiang M, Shi WJ, Deng KM, Chen JH, Chen RC
Received 15 September 2018
Accepted for publication 22 February 2019
Published 11 April 2019 Volume 2019:14 Pages 835—852
DOI https://doi.org/10.2147/COPD.S187661
Checked for plagiarism Yes
Review by Single-blind
Peer reviewers approved by Dr Cristina Weinberg
Peer reviewer comments 2
Editor who approved publication: Prof. Dr. Chunxue Bai
目的:评估健康者、稳定期慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)患者经磷酸缓冲盐溶液(PBS)处理的痰上清检测液相介质的重复性。
方法:健康受试者 9 例和稳定期慢阻肺患者 23 例分别在 6 天以内的不同日重复留取痰标本。采用 “两步痰液处理法” 获得经 PBS 处理的痰上清液和痰细胞。采用定制的固相芯片检测痰液上清中 10 种可溶性蛋白标记物以及 13 种自身抗原的抗体 IgG/IgM。通过配对检验、组内相关系数(ICC)、Bland-Altman 图评估重复测量的一致性。
结果:配对检验提示 PBS 痰上清中的 8/10 种可溶性蛋白标记物、全部 13 种自身抗体 IgG 和 12/13 种相应自身抗体 IgM 的重复检测无显著性差异。组内相关系数表明 PBS 痰上清中以下检测具有良好的可重复性(ICC>0.6):IL6、IL8、 IL13、 IL10、IL33、VEGF、 sRAGE、TNFα;抗 aggrecan、CENP-B、collagen II、collagen IV、cytochrome C、elastin、HSP47、HSP70、SS-B 的自身抗体 IgG; 抗 CENP-B、胶原蛋白 I、胶原蛋白 II、胶原蛋白 IV、细胞角蛋白 18 和 HSP70 的自身抗体 IgM;痰中性粒细胞、巨噬细胞和嗜酸性粒细胞计数。Bland-Altman 图提示所有指标的重复检测均具有良好的一致性。稳定期 COPD 患者与健康受试者的痰中性粒细胞百分比和嗜酸性粒细胞百分比、抗细胞色素 C IgG、抗 aggrecan IgM 和抗细胞色素 C IgM 水平存在显著差异。痰中抗胶原 II IgG 水平与支气管扩张剂后 FEV1% 水平呈显著正相关。
结论:本研究证实健康者和慢阻肺患者的 PBS 痰上清液相介质检测具有良好的可重复性。同时,我们采用高通量方法证实了慢阻肺患者气道中存在抗多种自身抗原的抗体 IgG 和 IgM。
Keywords: chronic obstructive pulmonary disease, soluble protein
markers, autoantibody, reproducibility, sputum