引言: 革兰阴性菌中的药物外排泵对细菌耐药发挥重要作用；但外排泵在 β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂合剂敏感性降低中的数据尚欠缺。在本课题中我们研究了替加环素不敏感肺炎克雷伯菌（TNSKP）中外排泵 AcrAB 对哌拉西林/他唑巴坦（TZP）和头孢洛扎/他唑巴坦（C/T）敏感性的影响。
方法：通过替加环素梯度诱导的方法获得的一系列 TNSKP 菌株，以及一株临床 TNSKP 菌株（TNSKP24）用于本研究。用肉汤微量稀释法测定抗生素最低抑菌浓度（MIC）；全基因组测序（WGS）分析基因组变化。用 PCR 并测序确定 ramR  基因，acrR  基因，以及 ramR-romA  基因间区突变情况，qRT-PCR 测定相关基因转录水平。对 3 株 TNSKP 菌株的 acrB  基因行同框敲除和回补。
结果：肺炎克雷伯菌 K2606 及其两个过表达外排泵 AcrAB 的子代（肺炎克雷伯菌 K2606-4 和肺炎克雷伯菌 K2606-16）用于进一步研究。在 K2606-4 和 K2606-16 中，TZP 和 C/T 的 MIC 较亲本肺炎克雷伯菌 K2606（TZP，2/4 μg/ml；C/T，0.25/4 μg/ml）分别有 4 到 8 倍的增加。肺炎克雷伯菌 TNSKP24，K2606-4 和 K2606-16 的 acrB  基因缺失分别使 TZP 和 C/T 的 MIC 降低 4 到 16 倍；acrB  基因回补使这两个药物 MIC 升高。克拉维酸、舒巴坦和阿维巴坦的 β-内酰胺类抗生素合剂的 MIC 在 acrB  基因敲除和回补肺炎克雷伯菌突变体中没有变化。
结论：本研究强调了在 TNSKP 菌株中多药外排泵 AcrAB 可引起 TZP 和 C/T 敏感性下降。
Keywords: drug efflux pump, Enterobacteriaceae , multidrug resistance, β-lactam/β-lactamase inhibitor combinations